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考马斯亮蓝反应原理是什么

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周俊贤
【认证专家】周俊贤

认证汽车师傅,拥有多年行业工作经验

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缩二脲反应、茚三酮反应和考马斯亮蓝反应是实验室里常用的蛋白质显色检测方法。咱们来聊聊这些反应背后的原理:

1、缩二脲反应:当蛋白质遇到碱性环境时,里头的肽键(特别是含有两个及以上肽键的结构)会和铜离子"牵手",生成显眼的紫色复合物。这个颜色变化就像是蛋白质和试剂之间的专属暗号。

2、茚三酮反应:在弱酸性条件下,蛋白质或者氨基酸里的游离氨基会跟茚三酮试剂"起反应",变出蓝紫色的产物。不过要注意,脯氨酸是个例外选手,它和茚三酮反应会生成黄色产物。

这里补充个"黄色反应"小知识:要是蛋白质里含有苯环结构(比如酪氨酸、色氨酸这类氨基酸),遇到浓硝酸就会显现出黄色,这个现象在皮肤接触浓硝酸时也能观察到。

考马斯亮蓝反应:这个染料本身是红色的"单身汉",当遇到蛋白质后,通过疏水作用结合就会"变身"成蓝色。颜色变化越明显,说明样本里的蛋白质含量越高。

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